Expresión, función e interacciones moleculares de Six6 y Six3 durante la morfogénesis del ojo de vertebrados

Resumen

La familia de genes Six/sine oculis codifica factores de transcripción implicados en diversos procesos durante el desarrollo embrionario de vertebrados e invertebrados. Uno de estos procesos es la morfogénesis del ojo, donde el gen Six3 de vertebrados desempeñan un papel esencial. En esta memoria se describe la clonación en humano, ratón y polo de Six6, un nuevo gen de la familia, que presenta una alta identidad de secuencia con Six3. Este nuevo gen completa la descripción de la familia Six en vertebrados, lo que posibilita realizar un análisis filogenético detallado de la misma. Estos datos, unidos a los de la localización cromosómica de los genes SIX humanos, han permitido postular un modelo de evolución de la familia Six/sine oculis a partir del ancestro común de todos los bilaterios. Se ha llevado a cabo el estudio del patrón de expresión de Six6 en embriones de pollo y ratón, comprobándose que se expresa en territorios de ojo desde estadios tempranos. En esta memoria igualmente, se describe la generación de anticuerpos que reconocen específicamente a Six3 y a Six6. Se describe la identificación del Tle1 y Aes, dos miembros de familia Groucho/Tle de co-represores transcripcionales, como proteínas que son capaces de interaccionar con Six6. Las interaciones se han caracterizado extensamente y se ha extendido el estudio a otros miembros de la familias respectivas, describiéndose que Six6 y Six3 son capaces de interaccionar de forma diferencial con Tle1. Finalmente, mediante ensayos realizados en embriones de pez medaka (Oryzias latipes), se muestra que Tle1 y Aes tienen efectos antagónicos durante la morfogénesis del ojo. Además, Tle1 es capaz de potenciar el fenotipo de sobrexpresión de Six3 y Six6, mientras que Aes antagoniza dichos efectos. Por último se proponen varios modelos de modulación de la actividad transcripcional de Six3 y Six6 por su interacción con Tle1 y Aes.