Regulacion por nitrogeno del metabolismo de atrazina en pseudomonas sp.Adp

Resum

Pseudomonas sp. ADP es capaz de emplear el herbicida atrazina como la única fuente de nitrógeno para su crecimiento, mediante una ruta consistente en seis pasos enzimáticos. A lo largo de esta tesis hemos demostrado que esta ruta de biodegradación está fuertemente reprimida en presencia de otras fuentes preferenciales de nitrógeno, independientemente de la presencia de atrazina. Esta represión se observa también en microcosmos de suelo y podría explicar en parte la persistencia de la atrazina en campos de cultivo abonados. Alterando el metabolismo del nitrógeno de Pseudomonas sp. ADP hemos obtenido una estirpe mutante que, a diferencia de la silvestre, es capaz de mineralizar la atrazina en suelos abonados con nitrato. Como se verá, una de las dianas principales de regulación es el operón atzDEF, que codifica las enzimas necesarias para los tres últimos pasos de la ruta. Su expresión es inducible por ácido cianúrico y reprimible por fuentes de nitrógeno de rápida asimilación, y la respuesta a estas dos señales es estrictamente dependiente de la presencia de AtzR, identificado en esta tesis como el regulador principal de la ruta. Según nuestros resultados, AtzR es el único factor regulador implicado en la activación directa de la transcripción del operón atzDEF, canalizando las señales de disponibilidad de nitrógeno y percibiendo directamente la presencia de ácido cianúrico. Por su parte, el control por nitrógeno de atzDEF se ejerce a tres niveles: i) regulando la expresión de atzR, ii) modulando la capacidad activadora de AtzR, y iii) controlando el acceso al interior celular del inductor específico de la ruta mediante transportadores. Estos tres niveles de regulación dependen del regulador global por nitrógeno NtrC, que actúa directamente en los niveles i) y, probablemente, iii), y mediante la proteína moduladora PII en el nivel ii). En resumen, nuestros resultados muestran como la ruta de mineralización de la atrazina de Pseud