Desarrollo, validación y mejora del sistema de expresión en cascada nahr/p sal/ xyls2
- Eduardo Santero Zuzendaria
Defentsa unibertsitatea: Universidad Pablo de Olavide
Fecha de defensa: 2004(e)ko iraila-(a)k 10
- Josep Casadesús Pursals Presidentea
- Andrés Garzón Idazkaria
- Alberto Guzman Carlos Kidea
- Víctor de Lorenzo Prieto Kidea
- Sebastian de Diego Chavez Kidea
Mota: Tesia
Laburpena
En la presente Tesis Doctoral se tratan distintas estrategias y aplicaciones de la superproducción de proteínas recombinantes en enterobacterias.En un primer capítulo se desarrolla la idea del sistema de expresión en cascada publicado por el Dr. Cebolla en 2001 (Cebolla A, et al; 2001). Seguidamente se implementa dicho sistema para la producción de colorante textil índigo, en cultivos discontinuos continuos, mientras se abordan distintos problemas relativos a la estabilidad del fenotipo superproductor, el fondo genético a usar y la posibilidad de realizar ingeniería metabólica para optimizar el proceso. En los siguientes capítulos se valida el sistema para controlar la expresión de proteínas recombinantes mediante una estirpe de Salmonella typhimurium instalada en su hospedador natural, el ratón. Esta aplicación ha servido para liberar proteínas marcadoras en tumores inducidos artificialmente, ya que estos son diana de determinado tipo de bacterias.Por último se mejora el sistema de expresión en cascada mediante la superimposición de un circuito de regulación de la transcripción a nivel de la elongación. Dicho sistema se conoce como atenuación de la transcripción. Mediante este sistema los niveles de inducción aumentan llegando a ser más de 1700 veces.