Reprogramación celular de células madre embrionarias de ratón para la obtención de células productoras de insulina

Resum

La diabetes es una de las enfermedades crónicas más comunes del mundo, se calcula que un 6% de la población española la padece y que un tercio de los diabéticos no están diagnosticados. Hay varios tipos de diabetes, siendo las más comunes la diabetes tipo I la diabetes tipo II. En este trabajo de investigación nos hemos centrado en la diabetes tipo I, que es una enfermedad autoinmune en la que se destruyen selectivamente las células productoras de insulina del páncreas endocrino. El tratamiento tradicional para esta enfermedad ha sido la terapia con insulina exógena, así como el trasplante de páncreas y riñón para los pacientes diabéticos avanzados con nefropatías. Otras alternativas en fase experimental son: el trasplante de islotes, los xenotrasplantes, la obtención de células beta a partir de la neogénesis y el trasplante de células productoras de insulina, centrándonos en este último caso en las células derivadas in vitro de las células madre embrionarias. Para esto último la presente tesis ha planteado el desarrollo de un sistema de reprogramación celular en células madre embrionarias de ratón. Dado que la célula beta no posee factores de transcripción específicos como para poder diseñar un protocolo eficaz de diferenciación dirigida, se ha procedido a introducir en las células madre embrionarias de ratón D3 (células diana) una mezcla de dichos factores procedentes de unas células donante para inducir en un contexto endodérmico el gen de la insulina I. El método desarrollado supone un paso más respecto al descrito en la literatura, consistente en permeabilizar la célula con una toxina denominada estreptolisina-O para luego proceder a la incubación con un cóctel reprogramador consistente en un extracto proteico de las células donante. En este trabajo se ha usado un sistema descrito recientemente en la literatura que aprovecha la ruta transmembrana para introducir proteínas en el interior celular. Este sistema se