Aplicación de modelos experimentales in vitro para el estudio de los efectos producidos por microcistinas

Resumen

Revisados los antecedentes bibliográficos, se manifiesta la importancia de incidir en el estudio de los efectos tóxicos de las floraciones y cultivos de cianobacterias, al igual que de MC puras, en peces debido a que: 1. Viven en el mismo medio en el que se produce el crecimiento de floraciones de cianobacterias y la consiguiente liberación de MC, siendo por tanto uno de los organismos más proclives a sufrir sus efectos tóxicos. 2. Su posible afectación subclínica pudiera suponer un peligro debido a su potencial consumo humano. Actualmente existe un gran interés social, ético, científico y económico en el desarrollo de métodos alternativos a los ensayos de ecotoxicidad que permitan la reducción del uso de los animales de experimentación. Teniendo en cuenta las consideraciones anteriores, se plantea la siguiente hipótesis de trabajo: ¿Son las líneas celulares de peces un substrato biológico adecuado para investigar la toxicidad de las MC y extractos de floraciones y cultivos de cianobacterias en peces? Para intentar contestar esta pregunta se plantea la comparación de los efectos bioquímicos y morfológicos de las tres MC más frecuentemente encontradas en floraciones naturales y de las que se disponen estándares de adecuada pureza como son MC-LR, MC-RR y MC-YR y dos extractos de cianobacterias (una floración natural y un cultivo de cepa aislada de M. aeruginosa) sobre dos líneas celulares de peces: la línea celular PLHC-1 proveniente de un carcinoma hepatocelular del ciprínido �Poeciliopsis lucida� y la línea celular RTG-2, derivada de células gonadales de la trucha arcoíris, �Oncorhynchus mykiss�. En esta línea, los objetivos del presente trabajo son: 1. Comprobar la utilidad de los cultivos de dos líneas celulares de peces PLHC-1 y RTG- para estudiar los efectos tóxicos y la toxicidad de las MC de adecuada pureza y de diversos extractos de células de cianobacterias conteniéndolas. 2. Estudiar cuál de las líneas celulares ensayadas e indicadores empleados son los más sensibles para las distintas MC y extractos de cianobacterias. 3. Comparar la toxicidad de distintos estándares de MC puras (MC-LR, MC-RR, MC-YR) en las líneas celulares de peces seleccionadas. 4. estudiar la posible acción sinérgica de las MC utilizando para ello una floración de cianobacterias, conteniendo distintos congéneres de MC. 5. investigar la posible influencia de otros compuestos, diferentes a MC, presentes en las floraciones y cultivos de cianobacterias que pudieran contribuir a la toxicidad de los mismos.