Regulación de la transferencia conjugativa del plásmido de virulencia de Salmonella enterica por Lrp y metilación Dam.

Resumen

El plásmido de virulencia de Salmonella enterica pertenece al grupo de plásmidos de la familia de F, o plásmidos F-like. La expresión del operón de transferencia de estos plásmidos está activada por la proteína TraJ, codificada porel gen traJ localizado corriente arriba del operón. La expresión de traJ está a su vez regulada por el sistema de inhibición de la fertilidad. Este sistema está formado por los genes finP y finO. El gen finP solapa con el gen traJ y especifica un ARN antisentido que, ayudado por la proteína FinO, bloquea la traducción del ARN mensajero de traJ, impidiendo la síntesis de la proteína TraJ y, como consecuencia, la expresión del operón de transferencia. Nuestros datos indican que la transcripción del genfinP de varios plásmidos de la familia de F, como los plásmidos F, F100 o el plásmido de virulencia de Salmonella enterica, es activada por metilación Dam. Estos resultados sugieren que la regulación de la transferencia conjugativa por metilación Dam es un fenómeno común entre los plásmidos tipo F. El alineamiento de la región promotora de varios plásmidos F-like mostró la existencia de una diana de metilación Dam (secuencia 5'-GATC-3') conservada en todos ellos, y que solapa parcialmente con el módulo -10 del promotor. Sin embargo, la metilación de esta diana GATC no afecta a la expresión de finP. Por tanto, podemos deducir que el efecto de la metilación Dam sobre la transcripción de finP es indirecto, y posiblemente mediado por alguna proteína reguladora no identificada que es a su vez, regulada por metilación Dam. Podría tratarse de un activador presente en fondo Dam+ o un represor presente en fondo Dam. La búsqueda de reguladores de la expresión del operón de transferencia mediante mutagénesis al azar con el transposón defectivo Tn10dCm identificó al gen lrp como un activador del operón. El gen lrp especifica la proteína Lrp (Leucine-responsive regulatory protei