Papel de la oxidación de proteínas implicadas en los mecanismos reguladores de la apoptosis (Bcl-2 y ANT) inducida por el óxido nítrico en células secretoras de insulina

Résumé

Los estudios relacionados con los mecanismos moleculares de acción del óxido nítrico (NO) son muy diversos; sin embargo, es mucho lo que se desconoce sobre ello. Un aspecto trascendental es su papel como modulador de la apoptosis. En otras tesis doctorales anteriormente realizadas en nuestro laboratorio se ha descrito que el NO a elevadas concentraciones induce apoptosis en las células RINm5F. En esta tesis presentamos evidencia de que las acciones apoptóticas del NO están relacionadas mecanísticamente con su capacidad de oxidar lípidos y proteínas. En la primera parte de la tesis mostramos que tanto el NO generado endógenamente por inducción de la iNOS por acción de la IL-1beta como el NO derivado de donadores químicos inducen la formación de productos finales de la peroxidación de lípidos, siendo dicha peroxidación disminuída significativamente por la superóxido dismutasa y la catalasa. En la segunda parte dela tesis mostramos que dos proteínas importantes en el control de la apoptosis, Bcl-2 y ANT, son oxidadas por acción del NO. Esta oxidación está principalmente mediada por los productos finales de la lipoxidación avanzada (ALEs) generados por el NO, ya que tanto al aminoguanidina (AG) como la piridoxamina (PM), inhibidores de la formación de los ALEs, cancelan la oxidación producida por el NO; asimismo, la AG y la PM disminuyen significativamente la apoptosis inducida por el NO. En la tercera parte de la tesis presentamos evicencias sobre el papel de la GAPDH en la apoptosis inducida por el NO. El NO inhibe la actividad de la GAPDH e induce su translocación desde el citoplasma al núcleo; estos efectos son dependientes de la formación de los ALEs inducida por el NO, ya que tanto la AG como la PM los cancelan.