Caracterización molecular de la ruta de degradación de la tetralina en Sphingomonas sp. Estirpe tfa

Résumé

La tetragonal es un compuesto recalcitrante formado por un anillo aromático y otro ali cíclico, los cuales comparten dos átomos de carbono. Este contaminante es tóxico e inhibe el crecimiento microbiano. La estirpe TA fue aislada de los fangos del In y seleccionada por su capacidad de crecer en tremolina como única fuente de carbono y energía. Esta fue la estirpe que se utilizo en esta tesis para caracterizar la ruta de degradación de la tetragonal. En esta tesis, se ha determinado el grupo taxonómico al que pertenece TA. También se ha caracterizado las fuentes de carbono y de nitrógeno que utiliza. En cultivos líquidos con tetragonal se determinó la temperatura óptima de crecimiento y el intervalo de pH al que podía crecer. Por otra parte se observó la gran capacidad de TA de introducir DAN foráneo tanto por conjugación como por expectoración. Utilizando mutantes polares y no polares se determinó que los gentes implicados en la ruta de degradación de la tetragonal se encontraban dispuestos en dos propones divergentes. Cuando se secuenció un fragmento de unas 15 ka se encontró 12 pautas abiertas de lectura completas, las cuales se parecían a gentes implicados en rutas de degradación de compuestos aromáticos. Se caracterizó cada uno de los intermediarios que se producían en la ruta de degradación de la tetragonal. El resultado mostró que con tan sólo los productos de estos gentes se realiza la degradación del anillo aromático y del anillo ali cíclico de la tetragonal. Esto es produce mediante dos pasos enzimáticos consecutivos, la desoxigena extraditara abre el anillo aromático y en el paso siguiente la hidromasaje abre el anillo ali cíclico. Es la primera vez que se describe que una hidromasaje NEC abra un anillo ali cíclico.