Caracterización estructural y electrofisiológica de la degeneración retiniana en ratones rd

Resumen

El sistema visual reviste un especial interés científico, ya que ha sido y sigue siendo particularmente atractivo para el estudio y comprensión del Sistema Nervioso Central (SNC) debido a su organización característica. La comprensión del funcionamiento general de la retina permite conocer su fisiología, aspecto importante para el estudio de las enfermedades degenerativas de la retina. La presente Tesis se basa en la hipótesis de que el proceso de distrofia retiniana en modelos de ratón de enfermedad degenerativa (ratones rd) puede afectar de forma reversible a otros tipos celulares, y que podría ser recuperable, al menos parcialmente por la (pro)insulina. Para confirmar dicha hipótesis fue necesario conocer en detalle el grado de degeneración retiniana de los modelos múridos donde se evaluó el posible efecto neuroprotector de la proinsulina. La presente Tesis se divide en dos estudios principales: El primer estudio consistió en la caracterización funcional de la retina de ratones afectados de distrofias retinianas, los ratones rd, tanto en animal in vivo como en células de la retina in vitro, comparándolo con animales controles sanos. El segundo estudio consistió en la evaluación del efecto de la proinsulina como posible agente neuroprotector sobre el proceso neurodegenerativo de los fotorreceptores en ratones transgénicos productores de proinsulina humana de forma constitutiva a nivel muscular (ratones ProIns/rd10). Las técnicas electrofisiológicas desarrolladas en la presente Tesis fueron la técnica del electrorretinograma y la técnica de pinzamiento de membrana (patch-clamp) ambas técnicas permitieron llevar a cabo los estudios planteados anteriormente. La evaluación funcional in vivo del primer estudio consistió en la realización de registros electrorretinográficos en dos modelos de ratones con degeneración de fotorreceptores ( ratones rd ) demostrando que el curso temporal de la degeneración retiniana que sufren los ratones rd 10 es mas lenta que en los rd1. Por otra parte, el estudio in vitro consistió en el registro de corrientes iónicas inducidas por glutamato, GABA y glicina en células bipolares de bastón en rodajas de retina de ratones rd10. Los resultados obtenidos mostraron que las células bipolares de bastón registradas en "slices" de retina de ratones distróficos presentaban prácticamente la misma sensibilidad a glicina en célelas bipolares de bastón de ratones distróficos es de mayor magnitud que en animales no distróficos. Finalmente, los resultados obtenidos en el segundo estudio mediante que los registros electrorretinográficos realizados a ratones trasgénicos productores de proinsulina a nivel muscular (proIns/rd10) mostraron una mayor respuesta en los ratones productores de proinsulina que en sus controles distróficos. Este resultado apunta sobre el papel neuroprotector de la proinsulina en las degeneraciones retinianas.