Metabolismo de acil-CoA y acil-ACP en girasol

Resumen

Metabolismo de acil-CoAs y acil-ACPs en girasol En muchas plantas, especialmente en las oleaginosas, los ácidos grasos se almacenan también en los triacilgliceridos como fuente concentrada de energía para el uso durante la germinación de la semilla. La síntesis ¿de novo¿ de ácidos grasos en plantas ocurre sobre todo en los plastidios. Las rutas de síntesis de ácidos grasos y lípidos en plantas han sido bien establecidas, pero se sabe poco sobre su regulación. En este proyecto se determinaron los siguientes objetivos; 1) La proteína portadora de acilos (Acyl Carrier Protein, ACP) es un componente crítico para la biosíntesis de ácidos grasos en plantas superiores. Esta pequeña proteína acídica (9kDa) porta las cadenas de acilos crecientes a través de los distintos pasos enzimáticos de la ruta de síntesis. Uno de los objetivos del trabajo es la identificación, clonación y caracterización de los genes responsables de los ACP en girasol para intentar comprender el papel de cada uno de ellos en la síntesis de ácidos grasos. Por tanto, se llevaron a cabo reacciones enzimáticas de las ACPs con dos enzimas tioesterasas (Fat) para determinar si las ACPs modulan el resultado final de la reacción enzimática. 2) Una vez exportados los acilos fuera del plastidio, estos se esterifican con la coenzimaA (CoA) entrando a formar parte del pool de acil-CoAs. Como siguiente objetivo se propone un estudio bioquímico del perfil acil-CoAs para las líneas seleccionadas. Además se estudiaran las enzimas acil-CoA sintetasas implicadas en la unión del grupo acilo al CoA. 3) Las proteínas que unen acil-CoAs (Acyl-CoA-binding proteins, ACBPs) son una familia de proteínas que contienen un dominio de unión a acil-CoAs que les permite unirse a estos con una alta especificidad y afinidad. Las ACBPs de 10 kDa han sido implicadas en el transporte de acil-CoAs, mantenimiento de los fondos intracelulares de acil-CoAs y en la protección de los acil-CoAs citosólicos de la degradación por parte de acil-CoA hidrolasas. Dado su papel, otro de los objetivos perseguidos será la identificación, clonación y caracterización de los genes que codifican las ACBPs de girasol, junto con la medida y caracterización de los pooles de acil-CoAs en distintos tejidos, condiciones de crecimiento y líneas mutantes de girasol. 4) Además, se llevaron a cabo estudios de localización mediante diferentes técnicas (Microscopía confocal e inmunoensayos) para confirmar la relación existente entre la actividad de las enzimas y la localización de las mismas.