Caracterización de una actividad D-malato oxidasa y estudio de los sistemas de defensa frente a DNAs exógenos en "Pseudomonas pseudoalcaligenes" CECT 5344

Resumen

La bacteria Gram negativa “Pseudomonas pseudoalcaligenes” CECT 5344 tiene la capacidad de asimilar cianuro en condiciones alcalinas, lo que la hace firme candidata para utilizarla en procesos de eliminación de residuos industriales contaminados con este compuesto. En un proyecto anterior se ha secuenciado el genoma de “P. pseudoalcaligenes” CECT 5344 y, una vez cerrado el cromosoma, se han identificado las principales capacidades metabólicas de la bacteria. Dentro de los estudios metabólicos que se han desarrollado, se ha detectado una actividad D-malato oxidasa en el periplasma de la bacteria, la cual ha sido caracterizada en este trabajo. Dada la importancia del D-malato, en la industria alimentaria, en trabajos posteriores, se intentará construir un biosensor con los datos obtenidos de esta enzima. Por último, se ha pretendido la generación de una cepa especialmente dotada para la construcción de mutantes, dado que éste es el principal sistema que se va a utilizar para el estudio de las funciones de los diferentes genes implicados en la(s) ruta(s) de asimilación de cianuro. Se han estudiado los Sistemas de Modificación Restricción de esta bacteria implicados en la eliminación de DNA exógeno, lo que dificulta la introducción de los DNAs modificados que servirían para la mutagénesis dirigida. En el genoma de esta bacteria se han identificado al menos los sistemas de Modificación-Restricción y otras dos regiones génicas que contienen los genes de sendos sistemas CRSPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats) que podrían estar también implicados en la protección contra la inserción de material genético exógeno.