Metabolismo de los ésteres de colesterol en los macrófagos derivados de monocitos humanos efectos del AMPc y estudio de la expresión de la lipasa sensible a las hormonas

Résumé

La acumulación de esteres de colesterol en los macrofagos (m0) constituye una característica ubicua de las lesiones ateroscleroticas. En la presente tesis se ha estudiado la regulación por ampc de la enzima que hidroliza los esteres de colesterol: La colesterol esterasa neutra (cen), empleando como modelo de estudio el del macrofago derivado de monocito humano en cultivo. Se ha desarrollado ademas un método nuevo de valoración de colesterol por hplc aplicable a cultivos celulares, con el que se ha estudiado la evolución de contenido de colesterol durante la maduración de los m0 humanos. Los resultados obtenidos muestran que, a diferencia de lo que sucede en los m0 de origen murino, como los de la linea j774, en los m0 derivados de monocitos humanos la c.E.N. No se activa por ampc, encontrándose incluso un efecto inhibidor de dicho compuesto sobre la desaparición de esteres de colesterol en este tipo celular. En vista de estas discrepancias, se realizo un estudio de la expresión de la lipasa sensible a hormonas (hsl) por técnicas de biología molecular (western but, northern blot, pcr) encontrándose que dicha enzima esta presente en los m0 j774, pero no en los humanos, por lo que la actividad c.E.N. En estos debe residir en una enzima diferente.