Paper de les cèl·lules natural killer a l'eliminació dels reservoris cellulars del VIH i ús de la nanotecnologia per potenciar la seva funció

Resumen

El Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH) causa una infección persistente que altera el sistema inmune de las personas infectadas, y representa una patología incurable a día de hoy. El tratamiento antirretroviral (TAR) disponible contra el virus es altamente efectivo en suprimir la carga viral por debajo del límite de detección de las técnicas comerciales actuales, reduciendo sustancialmente la mortalidad y morbidez asociada a la infección. Sin embargo, el TAR no es capaz de eliminar completamente el VIH del cuerpo humano. Esto es debido principalmente a la presencia de reservorios celulares, principalmente células T CD4+, que albergan genomas virales en su mayoría en estado de latencia, y que no son susceptibles al TAR ni a la acción del sistema inmunitario. Como consecuencia, una vez discontinuado el tratamiento, el VIH rebota de los citados reservorios y alcanza niveles detectables en cuestión de semanas. Por esta razón, nuevas estrategias dirigidas a eliminar estos virus, una vez revertida la latencia, son una prioridad en la investigación contra el VIH. Recientemente, la estrategia terapéutica denominada “shock and kill” está siendo ampliamente explorada para tal fin, y consiste en la inducción farmacológica de la expresión viral y la posterior eliminación por los efectos citopáticos del virus o por distintos mecanismos inmunes. En este sentido, el uso in vivo de fármacos reversores de la latencia ha conseguido una reactivación parcial del virus, sin embargo, en ninguno de los ensayos clínicos llevados a cabo hasta el momento se ha observado una disminución significativa del reservorio, resaltando la necesidad de potenciar el sistema inmune de los pacientes VIH+. Por lo tanto, nuevas aproximaciones terapéuticas integrando también el direccionamiento del sistema inmunitario a las células VIH+ reactivadas son cruciales en el intento de erradicar la infección viral. En este sentido, las células Natural Killer (NK), por la variedad y potencia de mecanismos inmunes que son capaces de mediar, son un candidato atractivo para el desarrollo de inmunoterapias contra el VIH. En la presente tesis, se describe en primer lugar, la existencia de un grupo de células reservorio, las cuales expresan la molécula CD32, con capacidad para evadir la respuesta inmune mediada por células NK. Específicamente, estas células T CD4+ CD32+ consiguen escapar en ensayos ex vivo al mecanismo de control mediado por inmunoglobulinas conocido como ADCC. Además, presentan mayor potencial de proliferación en respuesta a complejos inmunes, lo cual podría facilitar su persistencia en el organismo. En segundo lugar, se ha desarrollado un nuevo nanosistema consistente en nanopartículas de oro biespecíficas (BiAb-AuNPs), cargadas con dos anticuerpos específicamente dirigidos a las células VIH+ reactivadas y a las células NK. Además, se ha desarrollado un método de conjugación que logra la adsorción cooperativa de los anticuerpos sobre la nanopartícula, consiguiendo una disposición ordenada de los mismos en dominios, que facilita el contacto celular específico. Los resultados muestran la capacidad de las BiAb-AuNPs para penetrar en el tejido linfoide ex vivo y reducir la infección viral, así como de potenciar la eliminación mediada por células NK de las células reservorio tras la reactivación viral. En conclusión, los resultados revelan un mecanismo de evasión de la respuesta inmune NK por parte de la subpoblación de células reservorio CD32+, con implicaciones para el diseño de nuevas terapias dirigidas a erradicar los reservorios virales, y el potencial de un formato biespecífico, multivalente y polarizado como las BiAb-AuNPs, para su aplicación en estrategias de “shock and kill”.