Estudio del ciclo celular de las células troncales germinales del ovario de drosophila melanogasterpapel del regulador de matriz extracelular timp

Resumen

En el desarrollo embrionario y en el mantenimiento de tejidos adultos es esencial que se generen nuevas células que contribuyan al crecimiento y reparación de los tejidos cuando sea necesario. Para ello, los eucariotas superiores poseen poblaciones de células indiferenciadas, capaces tanto de autorrenovarse como de dar lugar a uno o varios tipos celulares diferentes; éstas son las llamadas células troncales. Las células troncales se suelen encontrar en microambientes especializados o nichos que regulan su capacidad de proliferación y evitan su diferenciación. Así, para el desarrollo y mantenimiento de los tejidos son claves tanto la correcta actividad de las células troncales como la de los nichos. Los nichos están formados por células de soporte y/o una matriz extracelular especializada. Esta tesis doctoral se centra en estudiar la influencia que la matriz extracelular puede ejercer sobre el comportamiento de las células troncales, utilizando para ello un modelo de células troncales adultas en su nicho natural, el nicho de células troncales germinales (GSCs, del inglés germ line stem cells) del ovario de Drosophila melanogaster. En primer lugar, este trabajo profundiza en la caracterización de algunos parámetros del ciclo celular de las GSCs en condiciones silvestres. Se detallan especialmente parámetros para los que no existe un consenso claro en la literatura, gracias a observaciones directas ex vivo. Parámetros como el comportamiento del espectrosoma, orgánulo específico de GSCs cuya morfología varía a lo largo del ciclo celular; comportamiento de marcadores de ciclo para detallar la progresión de las fases mediante el uso de la herramienta Fly-FUCCI (del inglés fluorescence ubiquitination cell cycle indicator); dinámica de espectrosomas; y eventos asociados a la división de estas células GSCs. En segundo lugar, se estudia el papel que la proteína reguladora de matriz extracelular Timp (del inglés tissue inhibitor of metalloproteinases) podría tener en el comportamiento de las GSCs, analizando la actividad de estas células en un contexto de ausencia de dicha proteína. En esta tesis se ha observado que la ausencia de Timp no afecta a la división de las GSCs, pero sí produce una alteración en la progresión del ciclo celular de estas células troncales, en las que también se observa una acumulación de daño genómico que podría estar desencadenando dichas alteraciones del ciclo. En ausencia de Timp, los ovarios de Drosophila presentan una menor rigidez del tejido, especialmente en el nicho de GSCs, por lo que esta tesis presenta un análisis de la posible relación existente entre el estado de la matriz extracelular y el comportamiento de células troncales en su nicho.